本文標題："用光學顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位細胞形狀研究顯微鏡"
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用光學顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位細胞形狀研究顯微鏡
細胞形狀的每時每刻維持也依賴于細胞骨架成分的裝配。
現(xiàn)有兩種實驗方法可用于檢測間期細胞骨架的裝配，但
這兩種方法都有某些局限性。一種方法是微注射可在體外裝
配的熒光標記蛋白，用光學顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位；某
些動力學特征可用光漂白測定。以這種方式觀察到的結(jié)構(gòu)幾
乎總是可信的，即其結(jié)果與免疫熒光所見相符合。微注射方
法有某些限制性，它們只能用于識別與溶相交換的結(jié)構(gòu)組分，
但是不能檢出在數(shù)小時內(nèi)不發(fā)生交換的極為穩(wěn)定的組分。它
們不能鑒別裝配和交換。注射后立刻彌散的方式變成為分離
定位的方式。這是與裝配成進行交換的結(jié)構(gòu)或與有限數(shù)目結(jié)
合部位的連接一樣都是相一致的。動力學可能起指令作用。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)a肌動蛋白和vinculin與粘附斑緊密地結(jié)合，但這
需要數(shù)小時，而它們所連接的結(jié)構(gòu)的形成和溶解只需數(shù)分鐘。
這表明，雖然蛋白質(zhì)密切地結(jié)合，但它們進入這些結(jié)構(gòu)的通路
不是細胞內(nèi)的主要途徑。這些研究的另一個局限性是熒光會
使結(jié)構(gòu)擴大。這些研究的要點是：(1)用此方法觀察到的裝
配通常是可靠的；(2)動力學上能與結(jié)構(gòu)本身的形態(tài)區(qū)別；(3)
在某些情況下，它是細胞特異的；(4)微管蛋白裝配的方向
與遠側(cè)快裝配端是一致的；(5)用這種技術(shù)在任何細胞中檢出
的最活動種類肌動蛋白比肌動蛋白單體大，提示細胞內(nèi)只有
極少量的肌動蛋白是游離G肌動蛋白，這些緩慢移行的
復(fù)合物可能是肌動蛋白低聚物。或是與肌動蛋白特異蛋白相
連接的肌動蛋白。
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